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Aplicação:
É suplementado com suplementos seletivos e de enriquecimento é utilizado para isolar e cultivar gonococos, meningococos e Haemophilus spp.
Preparação:
- Suspender 43.0g do pó em 1 litro de água destilada ou deionizada. Aquecer até dissolver completamente.
- Esterelizar em autoclave a 121°C por 15 minutos. Resfriar 45-50°C.
- Adicionar 5-10% de sangue de cavalo desfibrinado no meio assepticamente esterelizado e aquecer em banho maria controlando a temperatura a 80°C por 15 minutos.
- Resfriar a 45-50°C e adicionar 2 frascos de Suplemento de Crescimento Vitalex (código K25-81023) reconstituído com 5mL de solução restauradora Vitalex. Além disso, adicionar 2 frascos de Suplemento V.C.N (código K25-81022) reconstituído com 5mL de água destilada, a fim de obter um meio seletivo para Neisseria.
- Para análise das amostras de origens retal pode-se adicionar o Suplemento V.C.N.T (código K25-81024) ao invés do Suplemento V.C.N, a fim de inibir o crescimento excessivo de Proteus spp.
- Adicionar 2 frascos de Suplemento Haemophilus (código K25-81014), reconstituído com 5mL de água destilada a fim de obter um meio seletivo para Haemophilus. Preparar o meio como indicado e em seguida colocar em placas de Petri.
Especificações Técnicas:
Composição do Meio GC (g/l):
Peptona Proteose n°3 - 15.0
Amido de Milho - 1.0
Fosfato de Potássio Dibásico - 4.0
Fosfato de Potássio Monobásico - 1.0
Cloreto de Sódio - 5.0
Agar - 17.0
Composição do Suplemento V.C.N (mg/frasco):
Vancomicina - 1.5mg
Sulfato de Colistina - 3.75mg
Nistatina 6250 uL
*1 Frasco para 500mL do meio.
Composição Suplemento de Crescimento Vitalex (mg/frasco):
Vitamina B12 - 0.1mg
L-Glutamina - 100.0mg
Adenina SO4 - 10.0mg
Guanina HCL - 0.3mg
Ácido p-Aminobenzóico - 0.13mg
Coenzima 1 (NAD) - 2.5mg
Cocarboxilase - 1.0mg
Nitrato Férrico - 0.2mg
Hidrocloreto de Tiamina - 0.03mg
Hidrocloreto de Cisteína - 259.0mg
Composição da Solução Restauradora Vitalex (mg/frasco):
Glicose - 0.5mg
Água Destilada - 5.0mL
*1 Frasco para 500mL do meio.
Composição do Suplemento Haemophilus (mg/frasco):
Bacitracina - 150.0mg
Vancomicina - 5.0mg
Clindamicina - 0.5mg
*1 Frasco para 500mL do meio.
Composição do Suplemento L.C.A.T (mg/frasco):
Lincomicina - 0.5mg
Sulfato de Colistina - 3.0mg
Anfotericina B - 0.5mg
Trimetoprim - 3.25mg
*1 Frasco para 500mL do meio.
Composição do Suplemento V.C.A.T (mg/frasco):
Vancomicina - 1.0mg
Sulfato de Colistina - 3.75mg
Anfotericina B - 0.5mg
Trimetoprim - 3.25mg
*1 Frasco para 500mL do meio.
pH Final 7.2 + 0.2 a 25°C
Aparência do Meio:
Desidratado: Pó bege, fluído e homogêneo.
Preparado: Pó marrom-chocolate e opaco.
Controle de Qualidade:
Condições de Incubação: 36 ± 1°C por 24-48 horas, 5-10% CO2, meio basal.
Microrganismos ATCC Crescimento
Neisseria gonorrhoeae 43069 Bom
Haemophilus influenzae 10211 Bom
Condições de Incubação: 36 ± 1°C por 24-48 horas, meio basal + Suplemento V.C.N., V.C.N.T., V.C.A.T. ou L.C.A.T.
Microrganismos ATCC Crescimento
Neisseria gonorrhoeae 43069 Bom
Neisseria meningitidis 10211 Bom
Staphylococcus aureus 25923 Inibido parcialmente
Condições de Incubação: 36 ± 1°C por 24-48 horas, 5-10% de CO2, meio basal + Suplemento Haemophilus.
Microrganismos ATCC Crescimento
Enterococcus faecalis 43069 Bom
Haemophilus influenzae 10211 Bom
Armazenamento:
O pó é muito higroscópico: Armazenar entre 10-30°C, em um ambiente seco, em sua embalagem original bem fechada. Utilizar antes da data de validade informada no rótulo ou até que os sinais de deterioração ou contaminação sejam evidentes. Armazenar em placas preparadas entre 2-8°C.
Descarte:
Não descartar em esgotos ou lixos domésticos. O produto deve ser tratado conforme as regulações oficiais administrativas. Soluções em excesso e não recicláveis destinar para empresa responsável. As embalagens contaminadas devem ser eliminadas como produto não utilizado.
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